在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是 先加A液，混合后再加B液。具体操作步骤如下：
先加A液：
取1mL的0.1g/mL NaOH溶液（A液），加入到蛋白质样品中，并振荡均匀，以创造一个碱性环境。
再加B液：
接着加入3-4滴的0.01g/mL CuSO₄溶液（B液），并继续振荡均匀。此时，Cu²⁺离子在碱性条件下与蛋白质中的肽键反应，生成紫色络合物。
观察结果：
最后，观察并记录实验现象。如果出现紫色络合物，则说明样品中含有蛋白质。
这种方法的原理是双缩脲试剂中的A液（NaOH）提供碱性环境，而B液（CuSO₄）中的Cu²⁺离子在碱性条件下与蛋白质中的肽键反应，形成紫色络合物，从而实现对蛋白质的鉴定。
